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微生物細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室知識(shí)
來源: | 作者:邦博 | 發(fā)布時(shí)間: 575天前 | 499 次瀏覽 | 分享到:

微生物實(shí)驗(yàn)室一般由準(zhǔn)備室、普通實(shí)驗(yàn)室、滅菌室、恒溫培養(yǎng)室和無菌室五部分組成。他們的地板和墻壁的質(zhì)地都需要光滑堅(jiān)硬,同時(shí)還要保證儀器和設(shè)備的干凈整潔,便于打掃衛(wèi)生。今天咱們就來說說建設(shè)微生物細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計(jì)標(biāo)準(zhǔn)都有哪些:


一、準(zhǔn)備室


準(zhǔn)備室主要用于配備培養(yǎng)基和樣品處理等。準(zhǔn)備室不僅要洗刷器皿,還需要配有存放器具、試劑柜或材料的實(shí)驗(yàn)臺(tái)、專柜、冰箱、電爐和電源、上下水道等。同時(shí)室內(nèi)還應(yīng)設(shè)有加熱器、蒸鍋,洗刷器皿用的盆、桶等,還應(yīng)有各種去污粉、瓶刷、洗衣粉、肥皂等。


二、普通實(shí)驗(yàn)室


普通實(shí)驗(yàn)室主要是進(jìn)行微生物的觀察、計(jì)數(shù)和生理生化測(cè)定工作的場(chǎng)所。普通實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的陳設(shè)因工作側(cè)重點(diǎn)不同還有很大的差異。一般均需配備顯微鏡、實(shí)驗(yàn)臺(tái)、柜子和凳子。實(shí)驗(yàn)柜要足以容納日常使用的用具及藥品,同時(shí)還需要達(dá)到平整、光滑的要求。


三、恒溫培養(yǎng)室


1.培養(yǎng)室內(nèi)設(shè)備及用具


①外室應(yīng)有專用的工作服、鞋、帽、口罩、手持噴霧器和5%石炭酸溶液、70%酒精棉球等。


②內(nèi)室通常配備培養(yǎng)架和搖瓶機(jī)(搖床)。常用的搖瓶機(jī)有旋轉(zhuǎn)式、往復(fù)式兩種。


2培養(yǎng)室的滅菌、消毒


①同無菌室的滅菌、消毒措施。


②小規(guī)模的培養(yǎng)可不啟用恒溫培養(yǎng)室,而在恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行。


3.培養(yǎng)室的設(shè)置


①內(nèi)外室都應(yīng)在室中央安裝紫外線燈,以供滅菌用。


②為滿足微生物對(duì)溫度的需要,需安裝恒溫恒濕機(jī)。


③分隔內(nèi)室與外室的墻壁上部應(yīng)設(shè)帶空氣過濾裝置的通風(fēng)口。


④培養(yǎng)室應(yīng)有內(nèi)、外兩間,內(nèi)室是培養(yǎng)室,外室是緩沖室。房間容積不宜大,以利于空氣滅菌,內(nèi)室面積在3.2×4.4=14m2左右,外室面積在3.2×1.8=6m2左右,高以2.5m左右為宜,都應(yīng)有天花板。


四、滅菌室


滅菌室主要用于培養(yǎng)基的滅菌和各種器具的滅菌,滅菌室內(nèi)應(yīng)備有高壓蒸汽滅菌器、烘箱等滅菌設(shè)備和設(shè)施。


五、無菌室


無菌室也可稱之為接種室,主要用于系統(tǒng)接種、純化菌種等無菌操作的專用實(shí)驗(yàn)室。在微生物工作中,菌種的接種移植是一項(xiàng)主要操作,這項(xiàng)操作的特點(diǎn)就是要保證菌種純種,防止雜菌的污染。在一般環(huán)境的空氣中,由于存在許多塵埃和雜菌,很易造成污染,對(duì)接種工作干擾很大。


1無菌室工作規(guī)程


①無菌室滅菌。每次使用前開啟紫外線燈照射30min以上,或在使用前30min,對(duì)內(nèi)外室用5%石炭酸噴霧。


②用肥皂洗手后,把所需器材搬入外室;在外室換上已滅菌的工作服、工作帽和工作鞋,戴好口罩,然后用2%煤酚皂液將手浸洗2分鐘。


③將各種需用物品搬進(jìn)內(nèi)室清點(diǎn)、就位,用5%石炭酸在工作臺(tái)面上方和操作員站位空間噴霧,返回外室,5~10min后再進(jìn)內(nèi)室工作。


④接種操作前,用70%酒精棉球擦手;進(jìn)行無菌操作時(shí),動(dòng)作要輕 緩,盡量減少空氣波動(dòng)和地面揚(yáng)塵。


⑤工作中應(yīng)注意安全。如遇棉塞著火,用手緊握或用濕布包裹熄滅,切勿用嘴吹,以免擴(kuò)大燃燒;如遇有菌培養(yǎng)物灑落或打碎有菌容器時(shí),應(yīng)用浸潤(rùn)5%石炭酸的抹布包裹后,并用浸潤(rùn)5%石炭酸的抹布擦拭臺(tái)面或地面,用酒精棉球擦手后再繼續(xù)操作。


⑥工作結(jié)束,立即將臺(tái)面收拾干凈,將不應(yīng)在無菌室存放的物品和廢棄物全部拿出無菌室后,對(duì)無菌室用5%石炭酸噴霧,或開紫外線燈照射30min。


2.無菌室的設(shè)置


無菌室應(yīng)根據(jù)既經(jīng)濟(jì)又科學(xué)的原則來設(shè)置。其基本要求有以下幾點(diǎn):


①無菌室容積小而嚴(yán)密,使用一段時(shí)間后,室內(nèi)溫度很高,故應(yīng)設(shè)置通氣窗。通氣窗應(yīng)設(shè)在內(nèi)室進(jìn)門處的頂棚上(即離工作臺(tái)最遠(yuǎn)的位置),最好為雙層結(jié)構(gòu),外層為百葉窗,內(nèi)層可用抽板式窗扇。通氣窗可在內(nèi)室使用后、滅菌前開啟,以流通空氣。有條件可安裝恒溫恒濕機(jī)。


②無菌室應(yīng)有內(nèi)、外兩間,內(nèi)間是無菌室,外間是緩沖室。房間容積不宜過大,以便于空氣滅菌。最小內(nèi)間面積2×2.5=5m2,外間面積1×2=2m2,高以2.5m以下為宜,都應(yīng)有天花板。


③在分隔內(nèi)間與外間的墻壁或“隔扇”上,應(yīng)開一個(gè)小窗,作接種過程中必要的內(nèi)外傳遞物品的通道,以減少人員進(jìn)出內(nèi)間的次數(shù),降低污染程度。小窗寬60cm、高40cm、厚30cm,內(nèi)外都掛對(duì)拉的窗扇。


④內(nèi)間應(yīng)當(dāng)設(shè)拉門,以減少空氣的波動(dòng),門應(yīng)設(shè)在離工作臺(tái)最遠(yuǎn)的位置上;外間的門最好也用拉門,要設(shè)在距內(nèi)間最遠(yuǎn)的位置上。


3.無菌室的滅菌消毒


①噴霧:在每次使用無菌室前進(jìn)行。噴霧可促使空氣中微粒及微生物沉降,防止桌面、地面上的微塵飛場(chǎng),并有殺菌作用??捎?%石炭酸噴霧。


②薰蒸:這是無菌室徹底滅菌的措施。無菌室使用了較長(zhǎng)時(shí)間,污染比較嚴(yán)重時(shí),應(yīng)進(jìn)行薰蒸滅菌。可用甲醛、乳酸或硫磺薰蒸。


③紫外線照射:在每次使用無菌室前進(jìn)行。紫外線有較好的殺菌效果。通常應(yīng)開啟紫外線燈照射30~60min。


4.無菌室內(nèi)設(shè)備和用具


①在內(nèi)室和外室各安裝一個(gè)紫外燈(多為30W)。內(nèi)室的紫外線燈應(yīng)安裝在經(jīng)常工作的座位正上方,離地面2m,外室的紫外線燈可安裝在外室中央。


②無菌室內(nèi)的工作臺(tái),不論是什么材質(zhì)、用途的,都要求表面光滑和臺(tái)面水平。


③內(nèi)室應(yīng)有酒精燈、常用接種工具、不銹鋼制的刀、剪、鑷子、70%的酒精棉球、工業(yè)酒精、載玻璃片、特種蠟筆、記錄本、鉛筆、標(biāo)簽紙、膠水、廢物筐等。


④外室應(yīng)有專用的工作服、鞋、帽、口罩、盛有來蘇兒水的瓷盆和毛巾、手持噴霧器和5%石炭酸溶液等。